Siekalu pārbaude

Siekalu testēšana jeb Salivaomika ir diagnostikas metode, kas ietver siekalu laboratorisko analīzi, lai identificētu endokrīno, imunoloģisko, iekaisuma, infekcijas un cita veida stāvokļu marķierus. Siekalas ir noderīgs bioloģisks šķidrums steroīdu hormonu, piemēram, kortizola, ģenētiskā materiāla, piemēram, RNA, proteīnu, piemēram, enzīmu un antivielu, un

Siekalu testēšana jeb Salivaomika ir diagnostikas metode, kas ietver siekalu laboratorisko analīzi, lai identificētu endokrīno, imunoloģisko, iekaisuma, infekcijas un cita veida stāvokļu marķierus. Siekalas ir noderīgs bioloģisks šķidrums steroīdu hormonu, piemēram, kortizola, ģenētiskā materiāla, piemēram, RNA, proteīnu, piemēram, enzīmu un antivielu, un dažādu citu vielu, tostarp dabisko metabolītu, tostarp siekalu nitrīta, slāpekļa oksīda stāvokļa biomarķiera noteikšanai (skatiet tālāk par sirds un asinsvadu slimību biomarķieri: nitricoxidease marker, for Nitrical Oxidease). Siekalu testēšanu izmanto, lai pārbaudītu vai diagnosticētu daudzus stāvokļus un slimības stāvokļus [1], tostarp Kušinga slimību, anovulāciju, HIV, vēzi, parazītus, hipogonādismu un alerģiju. ASV valdība pat ir izmantojusi siekalu testu, lai novērtētu diennakts ritma izmaiņas astronautiem pirms lidojuma un lai novērtētu to karavīru hormonālos profilus, kuri iziet militārās izdzīvošanas mācības.[2][3]

Siekalu testēšanas atbalstītāji kā galvenās priekšrocības, salīdzinot ar asins analīzēm un citiem diagnostikas testu veidiem, min tā savākšanas vieglumu, drošību, neinvazivitāti, pieejamību, precizitāti un spēju apiet venipunktūru. Turklāt, tā kā var viegli iegūt vairākus paraugus, siekalu pārbaude ir īpaši noderīga, lai veiktu hronobioloģiskos novērtējumus, kas aptver stundas, dienas vai nedēļas. Veselu siekalu savākšanai ar pasīvo siekalu palīdzību ir neskaitāmas priekšrocības. Pasīvā seju savākšana atvieglo liela izmēra paraugu vākšanu. Līdz ar to tas ļauj paraugā pārbaudīt vairāk nekā vienu biomarķieri. Tas arī dod pētniekam iespēju sasaldēt atlikušo paraugu, lai to izmantotu vēlāk. Turklāt tas samazina piesārņojuma iespējamību, novēršot papildu savākšanas ierīces un nepieciešamību izraisīt siekalu plūsmu.[4]

Siekalošanās pārbaude, izmantojot dzīvsudrabu, tika veikta vismaz 1685. gadā.[5] Siekalu skābuma pārbaude notika vismaz 1808. gadā.[6] Siekalu testēšana klīniski tika izmantota vismaz 1836. gadā pacientiem ar bronhītu.[7] 1959. gadā zinātnieki žurnālā Cancer izvirzīja iespēju izmantot siekalās skābās fosfatāzes bioķīmiskās izmaiņas kā prostatas vēža klātbūtnes rādītāju.[8]

Jaunākie pētījumi ir vērsti uz steroīdu hormonu un antivielu noteikšanu siekalās. Jaunākie pieteikumi uzsver arvien sarežģītāku metožu attīstību, lai noteiktu papildu proteīnus, ģenētisko materiālu un uztura stāvokļa marķierus. Saskaņā ar Vonga teikto, zinātnieki tagad uzskata, ka siekalas ir "vērtīgs biošķidrums... ar iespēju iegūt vairāk datu, nekā pašlaik ir iespējams ar citām diagnostikas metodēm." [9]

Tehnika

Lielāko daļu siekalu testu veic, izmantojot enzīmu saistītu imūnsorbcijas testu (ELISA), polimerāzes ķēdes reakciju (PCR), augstas izšķirtspējas masas spektrometriju (HRMS) vai vairākas jaunākas tehnoloģijas, piemēram, optisko šķiedru noteikšanu. Visas šīs metodes ļauj noteikt specifiskas molekulas, piemēram, kortizolu, C-reaktīvo proteīnu (CRP) vai sekretoro IgA. Šāda veida pārbaude parasti ietver neliela daudzuma siekalu savākšanu sterilā mēģenē, kam seko apstrāde attālā laboratorijā. Dažas testēšanas metodes ietver siekalu savākšanu, izmantojot absorbējošu spilventiņu, ķīmiska šķīduma uzklāšanu un krāsas maiņas uzraudzību, lai norādītu uz pozitīvu vai negatīvu rezultātu. Šo metodi parasti izmanto kā aprūpes punkta (POC) metodi HIV skrīningam. Tomēr, izmantojot absorbējošus spilventiņus un ķīmiskos šķīdumus, imūntestu rezultātus var ļoti viegli sagrozīt. Douglas A. Grenger un viņa kolēģu pētījumi liecina, ka testosterona, DHEA, progesterona un estradiola biomarķieru rezultāti ir paaugstināti, ja tiek izmantoti savākšanas materiāli, kuru pamatā ir kokvilna, nevis paraugi, kas savākti ar citām metodēm (t.i., ar pasīvo siekalu).[10] Pētnieki pašlaik pēta siekalu testēšanas pieaugošo lomu kā daļu no ikdienas zobārstniecības vai medicīnas biroja pārbaudēm, kur siekalu savākšana ir vienkārša.[9]

Fizioloģiskais pamats

Cilvēkiem ir trīs galvenie siekalu dziedzeri: pieauss, zemžokļa un sublingvāls. Šie dziedzeri kopā ar papildu nelieliem siekalu dziedzeriem izdala bagātīgu bioloģisko ķīmisko vielu, elektrolītu, olbaltumvielu, ģenētiskā materiāla, polisaharīdu un citu molekulu maisījumu. Lielākā daļa šo vielu iekļūst siekalu dziedzeru acinusā un kanālu sistēmā no apkārtējiem kapilāriem caur audu šķidrumu, lai gan dažas vielas tiek ražotas pašos dziedzeros. Katras siekalu sastāvdaļas līmenis ievērojami atšķiras atkarībā no indivīda veselības stāvokļa un slimības klātbūtnes (orālas vai sistēmiskas). Izmērot šos komponentus siekalās, ir iespējams pārbaudīt dažādas infekcijas, alerģijas, hormonālos traucējumus un audzējus.

Klīniskā lietošana

Ar siekalu testu var noteikt šādus stāvokļus (saraksts nav pilnīgs): virsnieru slimības (piemēram, Kušinga slimība/sindroms un Adisona slimība), izmainīti sieviešu hormonu stāvokļi (piemēram, policistisko olnīcu sindroms [PCOS]), menopauze, anovulācija un hormonālas izmaiņas sievietēm, kas brauc ar velosipēdu), kā arī hipogona stāvoklis un vīriešu dzimumorgānu izmaiņas. hiperestrogēni stāvokļi), vielmaiņas traucējumi (piemēram, insulīna rezistence, diabēts un metaboliskais sindroms), labdabīgi un metastātiski jaunveidojumi (piemēram, krūts vēzis, aizkuņģa dziedzera vēzis un mutes vēzis), infekcijas stāvokļi (piemēram, HIV, vīrusu hepatīts, amebiāze un helicobacter pylori infekcija) un visi pārtikas alerģiskie stāvokļi (piemēram, pārtikas alerģijas).

Izmantošana uzvedības pētījumos

Siekalu testēšanu var izmantot arī klīniskos un eksperimentālos psiholoģiskos apstākļos. Tā kā tas spēj sniegt ieskatu cilvēka uzvedībā, emocijās un attīstībā, tas ir izmantots tādu psiholoģisku parādību kā trauksme, depresija, PTSS un citu uzvedības traucējumu pētīšanai.[11] Tās galvenais mērķis ir pārbaudīt kortizola un alfa amilāzes līmeni, kas norāda uz stresa līmeni. Siekalu kortizols ir labs stresa indekss, jo paaugstināts kortizola līmenis pozitīvi korelē ar paaugstinātu stresa līmeni. Kortizola līmenis laika gaitā paaugstinās lēnām, un paiet kāds laiks, lai atgrieztos bāzes līmenī, norādot, ka kortizols ir vairāk saistīts ar hronisku stresa līmeni.[12] No otras puses, alfa amilāze strauji palielinās, saskaroties ar stresa faktoru, un atgriežas sākotnējā stāvoklī drīz pēc stresa pārtraukšanas, padarot siekalu amilāzes mērījumus par spēcīgu instrumentu psiholoģiskiem pētījumiem, pētot akūtas stresa reakcijas.[12] Paraugus parasti ņem no dalībniekiem, liekot viņiem iesūkties caur salmiņu savākšanas mēģenē, vienlaikus piedzīvojot stimulu, un paraugus ņem ik pēc dažām minūtēm, lai reģistrētu pakāpeniskas stresa hormona līmeņa izmaiņas. Tā kā siekalu paraugu ņemšana ir neinvazīva, tās priekšrocība ir tā, ka tas nerada dalībniekam papildu stresu, kas citādi varētu izkropļot rezultātus.[13]

Konkrētākos pētījumos, kuros aplūkota saikne starp kortizola līmeni un psiholoģiskām parādībām, ir konstatēts, ka hroniski stresa faktori, piemēram, dzīvībai bīstamas situācijas (piemēram, slimības), depresija un sociālās vai ekonomiskās grūtības, korelē ar ievērojami augstāku kortizola līmeni.[13] Situācijās, kad subjektam ir izraisīta trauksme, augsts kortizola līmenis atbilst vairāk fizioloģisku nervozitātes simptomu, piemēram, sirdsdarbības ātruma palielināšanās, svīšana un ādas vadītspējas palielināšanās.[14] Turklāt tika atklāta negatīva korelācija starp kortizola sākotnējo līmeni un agresiju.[15] Tādējādi siekalu kortizola līmenis var sniegt ieskatu vairākos citos psiholoģiskos procesos.

Alfa amilāzes līmenis siekalās nodrošina neinvazīvu veidu, kā pārbaudīt simpatoadrenal medulāro (SAM) aktivitāti, ko citādi var izmērīt ar elektrofizioloģisko aprīkojumu vai asins plazmas rādījumiem. Ir konstatēts, ka siekalu alfa amilāzes līmenis korelē ar paaugstinātu autonomās nervu sistēmas aktivitātes līmeni, līdzīgi reaģējot uz hormonu norepinefrīnu.[16] Turpmākie atklājumi atklāj saistību starp α-amilāzi un konkurenci. Rezultāti parādīja, ka alfa amilāzes līmenis mainījās, reaģējot uz konkurenci, bet ne tad, kad to paredzēja. Turklāt, pārbaudot alfa amilāzes līmeni, zinātnieki pamanīja atšķirīgu reaktivitātes uzvedību starp indivīdiem ar iepriekšēju pieredzi līdzīgā situācijā.[17]

Lai gan siekalu testēšana sola nākotnē kļūt par vērtīgu un plašāk izmantotu rīku psiholoģiskajā izpētē, šai metodei ir arī daži trūkumi, kas jāpatur prātā, tostarp paraugu savākšanas un apstrādes izmaksas un paša pasākuma uzticamība. Izdarot secinājumus no pētījumiem, ir ievērojama daļa gan cilvēka, gan starp cilvēku kortizola līmeņa svārstībām[18].

Ir veikti daudzi pētījumi, lai sīkāk izpētītu mainīgos lielumus, kas veicina šīs atšķirības starp personām un personām. To mainīgo lielumu analīze, kas ietekmē kortizola līmeni, ir devusi plašu neskaidru mainīgo sarakstu.

Diennakts svārstības ir galvenais faktors cilvēka iekšienē, jo ir zināms, ka kortizola sākotnējais līmenis atšķiras atkarībā no diennakts laika. Personām, kas attīstās normāli un ievēro tipisku dienas-nakts grafiku, kortizola ražošana sasniedz maksimumu dažu pēdējo miega stundu laikā. Tiek uzskatīts, ka šī virsotne palīdz sagatavot ķermeni darbībai un stimulē apetīti pēc pamošanās.[19] Diennakts svārstības ietekmē arī psiholoģiskie apstākļi. Piemēram, ir konstatēts, ka kortizola līmenis agri no rīta ir paaugstināts kautrīgiem bērniem un vēlu vakarā paaugstināts depresīviem pusaudžiem, īpaši no pulksten diviem līdz četriem pēcpusdienā.[19] Tas var būt svarīgi, lai izprastu emocijas un depresijas simptomus.

Tālāk ir norādīti citi mainīgie, kas ietekmē atšķirības starp personām un personām. Sarakstam nav jābūt visaptverošam, un daudzu šo mainīgo lielumu ietekme varētu gūt labumu no turpmākiem pētījumiem un diskusijām.

• Vecums ir viens no galvenajiem faktoriem, kas nosaka atšķirības starp cilvēkiem. Daži pētījumi liecina, ka bērniem un pusaudžiem ir lielāka kortizola aktivitāte, kas var būt saistīta ar attīstību.[20]
• Ir konstatēts, ka dzimums ietekmē kortizola bāzes līmeni, veicinot atšķirības starp cilvēkiem. Ir konstatēts, ka parasti stresa situācijās kortizola līmenis vīriešiem palielinās līdz gandrīz divas reizes, salīdzinot ar sievietēm.[20] Tomēr stresa situācijās (t.i., sociālās noraidīšanas izaicinājumā) sievietēm, bet ne vīriešiem, ir tendence uzrādīt ievērojami augstāku kortizola līmeni.[20]
• Ir konstatēts, ka menstruālais cikls ietekmē kortizola līmeni organismā, ietekmējot gan atšķirības starp cilvēkiem, gan starp cilvēkiem. Tiek ziņots, ka sievietēm luteālās fāzē kortizola līmenis ir vienāds ar vīriešiem, kas liecina, ka nav atšķirības starp dzimumiem garozas bāzes līmenī, kad sievietēm nenotiek ovulācija. Sievietēm folikulu fāzē un sievietēm, kuras lieto perorālos kontracepcijas līdzekļus, kortizola līmenis ir ievērojami zemāks, salīdzinot ar vīriešiem un sievietēm luteālās fāzē.[20]
• Ir konstatēts, ka grūtniecība palielina kortizola līmeni organismā. Jo īpaši ir konstatēts, ka barošana ar krūti īstermiņā samazina kortizola līmeni pat tad, ja māte ir pakļauta psihosociālam stresam.[20]
• Ir zināms, ka nikotīns palielina kortizola līmeni organismā, jo tas stimulē HPA asi. Pēc vismaz divām cigaretēm smēķētājiem ir ievērojams siekalu kortizola līmeņa paaugstināšanās. Turklāt pastāvīgajiem smēķētājiem ir vājāka siekalu kortizola reakcija uz psiholoģiskiem stresa faktoriem.[20]
• Ir konstatēts, ka pārtika ietekmē kortizola līmeni. Ir konstatēts, ka proteīnu klātbūtne palielina kortizola līmeni.[20] Šo mainīgo lielumu bieži ietekmē dienas svārstības, kur kortizols ir ievērojami augstāks pusdienlaikā nekā vakariņu laikā, un dzimums, sievietēm pēc ēšanas ir augstāks kortizola līmenis nekā vīriešiem.[20]
• Lai gan dažos pētījumos, kuros pētīta alkohola patēriņa un kofeīna uzņemšanas ietekme uz kortizola bāzes līmeni, ir konstatētas pozitīvas korelācijas, rezultāti ir dažādi, un tos būtu lietderīgi veikt turpmāka pārbaude.
• Intensīva vai ilgstoša fiziskā slodze var izraisīt paaugstinātu kortizola līmeni. Īslaicīga un zema līmeņa vingrošana tikai nedaudz palielina kortizola līmeni.[20]
• Ir konstatēts, ka atkārtota sākotnēji stresa stimulu iedarbība izraisa kortizola līmeņa izlīdzināšanos organismā.[20]
• Ir pierādīts, ka dzimšanas svars ir apgriezti saistīts ar kortizola bāzes līmeni; zems dzimšanas svars ir saistīts ar augstu kortizola līmeni.[20]
• Ir konstatēts, ka pozīcija sociālajā hierarhijā ietekmē kortizola līmeni. Vienā pētījumā īpaši tika aplūkota 63 armijas darbinieku izlase un konstatēts, ka sociāli dominējošie subjekti uzrādīja augstu siekalu kortizola līmeņa paaugstināšanos, salīdzinot ar tikai nelielu paaugstinājumu pakārtotiem vīriešiem pēc stresa iedarbības un fiziskās slodzes.[20]
• Ir konstatēts, ka daži medikamenti (piemēram, glikokortikoīdi, psihoaktīvās zāles, antidepresanti) ietekmē kortizola līmeni organismā, taču šo ietekmi pētījušos pētījumu rezultāti ir dažādi.[20] Zāļu ietekme uz kortikālo līmeni varētu gūt labumu no turpmākiem pētījumiem.

Pierādījumi un pašreizējie pētījumi

Kortizola un melatonīna aberācijas

2008. gadā Endokrīnās sistēmas biedrība publicēja Kušinga sindroma diagnostikas vadlīnijas, kurās ieteica veikt pusnakts siekalu kortizola testu divas dienas pēc kārtas kā vienu no iespējamiem sākotnējās skrīninga instrumentiem.[21] 2009. gada pārskatā tika secināts, ka vēlu nakts siekalu kortizola testēšana ir piemērota alternatīva seruma kortizola testēšanai Kušinga sindroma diagnosticēšanai, ziņojot, ka gan jutība, gan specifiskums pārsniedz deviņdesmit procentus.[22] 2010. gadā Sakihara et al. novērtēja siekalu, plazmas un urīna kortizola līmeņa lietderību un precizitāti un noteica, ka siekalu kortizols ir "izvēles metode" Kušinga sindroma skrīningam.[23] 2008. gadā Restituto et al. konstatēja, ka agri no rīta siekalu kortizols ir "tik pat labs kā serums" kā Adisona slimības skrīninga paņēmiens.[24] 2010. gadā Bagcim et al. konstatēja, ka siekalu melatonīna līmenis "atspoguļo seruma līmeni jebkurā diennakts laikā" un ir uzticama alternatīva seruma melatonīnam, lai pētītu čiekurveidīgo fizioloģiju jaundzimušajiem.[25] 2008. gada pārskata rakstā siekalu melatonīna testēšana aprakstīta kā "praktiska un uzticama metode lauka, klīniskiem un pētnieciskiem izmēģinājumiem".[26]